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康為世紀 柱式基因組DNA提取試劑盒

  • 型   號:CW2298M
  • 價   格:

產品名稱:康為世紀 柱式基因組DNA提取試劑盒
產品貨號:CW2298M
英文名稱:Universal Genomic DNA Kit
產品規(guī)格:200 preps

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產品介紹:

 本試劑盒適合于從新鮮或冷凍的動物組織、細胞、血液、細菌等多種樣品中提取高純度總DNA。本品可純化獲得分子量最大為50 kb的核酸片段,純化過程不需使用苯酚或氯仿等有毒溶劑,無需乙醇沉淀。本試劑盒采用優(yōu)化的緩沖體系使裂解液中的DNA高效特異的結合到硅基質離心吸附柱上,PCR和其他酶促反應的抑制劑可通過兩步洗滌步驟被有效去除,最后使用低鹽緩沖液或水洗脫,即可得到高純度DNA。純化得到的DNA可以直接用于酶切、PCR、Real-Time PCR、文庫構建、Southern Blot、分子標記等下游實驗。


產品名稱:康為世紀 柱式基因組DNA提取試劑盒

產品貨號:CW2298M



產品組份:

組分2.png


自備試劑:

無水乙醇

Enzymatic Lysis Buffer(提取革蘭氏陽性菌基因組DNA時須準備)。

Enzymatic Lysis Buffe配方:20 mM Tris,pH8.0;2 mM Na2-EDTA;1.2% Triton

X-100;終濃度為20 mg/ml的Lysozyme(溶菌酶)。


產品特點:

●簡單方便:提取速度快,僅需40分鐘即可完成基因組DNA提取。

●高純度:純化得到的DNA ODSen.s.比值在1.7-1.9之間,完整度高(>15 kb),可用于二代測序、定量PCR、芯片檢測等下游實驗。

●高通量:可與液體工作站、磁珠法自動純化系統(tǒng)匹配使用。


 

實驗前準備及重要注意事項:

1.向Proteinase K中加入用量的Proteinase K Storage Buffer使其溶解,-20℃保存。配制好的Proteinase K勿長時間室溫放置,避免反復凍融,以免影響其活性。

2.樣品應避免反復凍融,否則會導致提取的核酸片段較小且提取量下降。

3.如果提取次生代謝產物大量積累或細胞壁厚的細菌培養(yǎng)物的基因組,建議在對數生長期早期收集樣品。

4.第一次使用前應按試劑瓶標簽的說明在Buffer GW1和Buffer GW2中加入無水乙醇。

5.使用前請檢查Buffer GTL和Buffer GL是否出現(xiàn)結晶或者沉淀,如有結晶或者沉淀,請將Buffer GL和Buffer GTL于56℃水浴重新溶解。

6.如果下游實驗對RNA污染比較敏感,可以在加入Buffer GL前加入4 μl DNase-Free的RNase A(100 mg/ml)


 


操作步驟:

血液及細胞樣本基因組提取

1.材料處理

1a. 如果提取材料為哺乳動物抗凝血液(無核紅細胞),可直接向50-200 μl新鮮或冷凍的抗凝血液樣品中加入Buffer GTL補足至200 μl;

1b. 如果提取材料為禽類、鳥類、兩棲類或更低級生物的抗凝血液,其紅細胞為有核細胞,取5-10 μl新鮮或冷凍的抗凝血液樣品,加入Buffer GTL補足至200 μl;

1c.貼壁培養(yǎng)的細胞應先處理為細胞懸液(最大提取量為5×106個細胞),2,000rpm(400×g)離心5分鐘,棄盡上清,加200 μl GTL,振蕩至樣品*懸?。?/span>

2.加入20 μl Proteinase K。

3.加入200 μl Buffer GL,渦旋震蕩充分混勻,56℃水浴10分鐘。

4.短暫離心以去除管蓋內壁的水珠。加入200 μl無水乙醇,渦旋震蕩充分混勻。短暫離心。

5.上一個步驟中所得溶液全部加入到已裝入收集管的吸附柱(Spin Columns DM)中,若一次不能加完溶液,可分多次轉入。12,000 rpm(~13,400 ×g) 離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。

6.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW1(使用前檢查是否已加入無水乙醇),12,000 rp離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。

7.向吸附柱中加入500 μl Buffer GW2(使用前檢查是否已加入無水乙醇),12,000 rpm離心1分鐘,倒掉收集管中的廢液,將吸附柱重新放回收集管中。

8.12,000 rpm離心2分鐘,倒掉收集管中廢液。將吸附柱置于室溫數分鐘,以*晾干。

9.將吸附柱置于一個新的離心管(自備)中,向吸附柱的中間部位懸空加入50-200 μlBuffer GE或滅菌水,室溫放置2-5分鐘,12,000 rpm離心1分鐘,收集DNA溶液,-20℃保存DNA。


 

保存條件:室溫(15-30℃)



產品訂購信息:

品牌             貨號                   名稱                                     規(guī)格

康為世紀  CW2298M    Universal Genomic DNA Kit     200preps



產品名稱:康為世紀 柱式基因組DNA提取試劑盒

產品貨號:CW2298M


關于公司:

康為世紀是主要從事高附加值、高技術含量的生物試劑的研發(fā)與生產,為生命科學研究、基因檢測和體外診斷用戶提供創(chuàng)新型生物產品和服務。康為世紀建立了專業(yè)化、集約化、能夠形成自主知識產權的技術創(chuàng)新體系和開放式的合作創(chuàng)新平臺,構建成了公司完整的研發(fā)創(chuàng)新體系。產品線主要包括分子診斷原料酶、核酸采集與保護劑、核酸提取試劑盒、分子診斷檢測試劑等,打破了中國生物研究與產業(yè)對進口試劑的依賴。


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