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illumina MiniSeq病毒基因測序試劑盒
產品名稱:illumina MiniSeq病毒基因測序試劑盒產品貨號:FC-420-1003上網搜索:illumina代理商、illumina授權代理商、illumina國內代理商、illumina中國代理商、illumina全國代理商、illumina代理商,就找華雅思創(chuàng)生物!買試劑 找華雅更多生物試劑 就在華雅思創(chuàng)—【華雅思創(chuàng)為您考慮更多!??!】
產品名稱:Miniseq High Output Reagent Kit(300-cycles)基因測序試劑盒
產品貨號:FC-420-1003
產品規(guī)格:
大輸出 7.5 Gb(MiniSeq High Output Reagent Kit (300-cycles))
每次運行的大讀數(shù) 高達2500萬
試劑類型 簇生成,配對末端測序,合成測序
核酸類型 DNA,RNA
系統(tǒng)兼容性 MiniSeq
技術 測序
產品介紹:
-illumina測序原理步驟:一、sample prep(樣本準備):基因文庫制備(一個基因組切斷再加接頭)二、cluster generaton(簇的形成):文庫在測序芯片(流動池flowcell)上不斷擴增,形成橋式PCR,再切掉反向鏈(reverse strand),形成許多簇相同的正向序列(正向鏈forward strand)。Snipaste_2019-02-08_21-42-31.png image.png
三、sequencing(測序):熒光信號、可逆阻斷終止技術、Sequences-by-Synthesis
四、data analysis(數(shù)據(jù)分析)具體內容:
一、基因文庫:
image.png 接頭不僅含有與測序芯片上互補的序列,有時還有index序列,由于測序芯片的強大,一個芯片可以同時測許多樣本(動物、植物、微生物),那如何區(qū)分測序數(shù)據(jù)來自哪個樣本呢?加標簽即加index序列,從而來區(qū)分不同的樣本。
二、橋式PCR:文庫種到測序芯片,并進行擴增的過程。
測序芯片:
Snipaste_2019-02-06_11-40-11.png
圖片發(fā)自簡書App 形成簇之后,加入帶不同熒光標記的dNTP(含有疊氮基團)和聚合酶,使得帶熒光標記的dNTP結合到測序鏈上,再進行激光掃描,得到熒光,推出結果。堿基結合到測序鏈并發(fā)出熒光信號的過程被稱為Sequences-by-Synthesis。
image.png
image.png 由于疊氮基團的存在(可逆阻斷終止技術),一個循環(huán)只能延長一個堿基,即一個堿基結合到測序鏈上為一個循環(huán),當結合上一個堿基后,把其他dNTP和酶用水沖掉,然后進行激光掃描,根據(jù)激光掃描顏色判斷是哪個堿基,根據(jù)互補原則反推出結果,再切掉疊氮基團,進入新的循環(huán),加入新的dNTP和酶,再延長堿基,沖掉dNTP和酶,再激光掃描。讀取index(Barcode): 和讀取測序鏈一樣的原理,讀取的目的是為了確定樣本的來源。
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基因測序是一種新型基因檢測技術,能夠從血液或唾液中分析測定基因全序列,預測罹患多種疾病的可能性,個體的行為特征及行為合理。基因測序技術能鎖定個人病變基因,提前預防和治療。
基因測序相關產品和技術已由實驗室研究演變到臨床使用,可以說基因測序技術,是下一個改變世界的技術 。
基因測序只是基因檢測的方法之一,其又叫基因譜測序,是上*的一種基因檢測標準。
基因測序廣為人知的還有針對唐氏綜合征篩查的無創(chuàng)產前基因檢測。只需要采集孕婦的外周血,通過對血液中游離DNA(包括胎兒游離DNA)進行測序,并將測序結果進行生物學分析,從而得出胎兒是否患有染色體數(shù)目異常的疾病,包括常見的21-三體綜合征(唐氏綜合征)、18-三體綜合征(愛德華氏綜合征)和13-三體綜合征(Patau綜合征)。
cDNA文庫顯然比基因組DNA文庫小得多,能夠比較容易從中篩選克隆得到細胞特異表達的基因。但對真核細胞來說,從基因組DNA文庫獲得的基因與從cDNA文庫獲得的不同,基因組DNA文庫所含的是帶有內含子和外顯子的基因組基因,而從cDNA文庫中獲得的是已經過剪接、去除了內含子的cDNA。
真核生物基因組DNA十分龐大,其復雜程度是蛋白質和mRNA的100倍左右,而且含有大量的重復序列. 采用電泳分離和雜交的方法,都難以直接分離到目的基因.這是從染色體DNA為出發(fā)材料直接克隆目的基因的一個主要困難。
高等生物一般具有10^5種左右不同的基因,但在一定時間階段的單個細胞或個體中,都僅有15%左右的基因得以表達,產生約15000種不同的mRNA分子.可見,由mRNA出發(fā)的cDNA克隆,其復雜程度要比直接從基因組克隆簡單得多。
cDNA文庫在研究具體某類特定細胞中基因組的表達狀態(tài)及表達基因的功能鑒定方便具有特殊的優(yōu)勢,從而使它在個體發(fā)育、細胞分化、細胞周期調控、細胞衰老和死亡調控等生命現(xiàn)象的研究中具有更為廣泛的應用價值,是研究工作中zui常使用到的基因文庫。
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