以下介紹了一些非常常見的的移液技巧錯誤以及避免方法。
常見錯誤
1.錯誤的吸頭入液深度
正確的入液深度多可使準(zhǔn)確度提高5%。微量移液器的吸頭入液深度應(yīng)當(dāng)為1-2mm,大量程移液器的吸頭入液深度為3-6 mm,具體取決于吸頭大小。如果吸頭入液太深,那么吸頭中的氣壓會增大,導(dǎo)致吸入過多的液體。
2.不正確的移液角度
移液器吸頭在樣品中的入液角度應(yīng)當(dāng)盡量接近90度,與重直方向偏離不超過20度。角度太大可能導(dǎo)致吸頭中吸入太多的液體,造成吸液不準(zhǔn)確。例如,在與重直方向呈30度角時,可過多吸入達(dá)0.7%的液體。
3.分液不統(tǒng)一
通過確保后剩余的液滴*分液而非依附到吸頭前端,從而獲得準(zhǔn)確性和樣品之間的可再現(xiàn)性。 對于絕大多數(shù)應(yīng)用,建議用吸頭前端沿著容器壁進(jìn)行分液,因為這可減少或消除殘留在吸頭里的樣品量。該技巧可提高1%或更高的準(zhǔn)確性。
4.錯誤潤洗
用移液器分液液體時,會在吸頭內(nèi)壁覆有一層液體,結(jié)果使排出的液體量稍微少于所要求的量。用將要使用的液體預(yù)先潤洗新吸頭至少兩次,調(diào)節(jié)好吸頭內(nèi)側(cè)。
5.移液節(jié)奏不一致
所有的樣品之間都應(yīng)保持一致的移液節(jié)奏。避免匆忙或快速的操作,要掌握移液過程中每個步驟的節(jié)奏。
移液器使用注意事項
(1)吸取液體時一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指,絕不允許突然松開,以防將溶液吸入過快而沖入取液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏氣。
(2)為獲得較高的精度,吸頭需預(yù)先吸取一次樣品溶液,然后再正式移液,因為吸取血清蛋白質(zhì)溶液或有機(jī)溶劑時,吸頭內(nèi)壁會殘留一層“液膜”,造成排液量偏小而產(chǎn)生誤差。
(3)濃度和粘度大的液體,會產(chǎn)生誤差,為消除其誤差的補(bǔ)償量,可由試驗確定,補(bǔ)償量可用調(diào)節(jié)旋鈕改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來進(jìn)行設(shè)定。
(4)可用分析天平稱量所取純水的重量并進(jìn)行計算的方法,來校正取液器,1mL蒸餾水20時重0.9982g。
(5)移液器反復(fù)撞擊吸頭來上緊的方法是非常不可取的,長期操作會使內(nèi)部零件松散而損壞移液器。
(6)移液器未裝吸頭時,切莫移液。
(7)在設(shè)置量程時,請注意?旋轉(zhuǎn)到所需量程?數(shù)字清清楚楚在顯示窗中?所設(shè)量程在移液器量程范圍內(nèi)不要將按鈕旋出量程,否則會卡住機(jī)械裝置,損壞了移液器。
(8)移液器嚴(yán)禁吸取有強(qiáng)揮發(fā)性、強(qiáng)腐蝕性的液體(如,濃酸、濃堿、有機(jī)物等)。
(9)嚴(yán)禁使用移液器吹打混勻液體。
(10)不要用大量程的移液器移取小體積的液體,以免影響準(zhǔn)確度。同時,如果需要移取量程范圍以外較大量的液體,請使用移液管進(jìn)行操作。
以上常見的錯誤使用真的會導(dǎo)致實驗結(jié)果出現(xiàn)失誤,除了操作問題,當(dāng)然質(zhì)量較好的移液器有些可以避免這些問題的錯的發(fā)生。所以今天給大家推薦美國RAININ公司一些移液器及特殊的吸頭。
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