微量混合DNA是法醫(yī)DNA檢驗的難題,因為對多人混合的DNA圖譜進行拆分比較困難。分離單細胞后檢測全基因組DNA可以避免處理混合DNA。
單細胞通過二代測序檢測DNA的方法流程:
細胞分離、裂解、單細胞全基因組擴增和二代測序。
目前,已有多種以單個基因組為模板的全基因擴增技術(shù),包括
寡核苷酸引物 PCR 技術(shù)(degenerate oligonucleotideprimed PCR, DOP-PCR)
多重置換擴增技術(shù)(multipledisplacement amplification, MDA)
多次退火環(huán)狀循環(huán)的擴增技術(shù)(multiple annealing and looping-based amplification cycles, MALBAC)
PicoPLEX技術(shù)相比這些WGA技術(shù),具有zui高的可重復(fù)性。
WGA:whole genome amplification,全基因組擴增技術(shù)
參考文獻:
單細胞分離檢驗技術(shù)在法醫(yī)學中的應(yīng)用研究
豐 蕾 1,楊 帆 2,李彩霞 1,徐 珍 1,凃 政 1,李萬水 1,胡 蘭 1,*
刑事技術(shù) 2015 年 第 40 卷 第 5 期
PicoPLEX® WGA Kit單細胞全基因組擴增試劑盒介紹
英文名稱:Rubicon PicoPLEX WGA Kit
中文名稱:Rubicon PicoPLEX單細胞全基因組擴增試劑盒
品牌:Rubicon Genomics
貨號:R30050或RB3050(TAKARA版)
從單細胞中擴增DNA構(gòu)建高重復(fù)性的文庫現(xiàn)在成為可能!PicoPLEX WGA kit采用技術(shù),設(shè)計、優(yōu)化用于從單細胞中擴增單拷貝基因組DNA。便捷的單管操作流程減少了手動操作的失誤,縮短了獲得結(jié)果的時間并降低背景。PicoPLEX WGA Kit同樣也可用于6 pg至50 pg的純化gDNA,并兼容微陣列比較基因組雜交(array CGH)分析及PCR。
華雅旗下紅榮微再主營醫(yī)療核酸保存文庫擴增等產(chǎn)品,授權(quán)代理(上海)Rubicon Genomics單細胞文庫擴增試劑。